凍存細(xì)胞的復(fù)蘇

來源：上海西格生物科技有限公司 >> 進(jìn)入該公司展臺(tái) 2022/09/28 11:31:17 已瀏覽：次

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凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

1、液氮罐中取出凍存管，確認(rèn)凍存管標(biāo)簽，37℃水浴，避免水沒過管帽，持續(xù)搖動(dòng)， 1分鐘內(nèi)即可融化。（注意液氮中取出后，避免長時(shí)間暴露于常溫，或令其緩慢回溫，此舉可致細(xì)胞死亡率嚴(yán)重增加）。

2、凍存管內(nèi)細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移入離心管，以5ml/min（通常凍存管為2ml體系，則在半分鐘左右再加入2ml培養(yǎng)基）的速度緩慢加入培養(yǎng)基，開始時(shí)逐滴加入，隨后可漸加快，逐步稀釋細(xì)胞和DMSO。

3、一定轉(zhuǎn)速離心10min，去上清液；

4、培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，接種細(xì)胞至培養(yǎng)瓶；

5、24h后觀察并確認(rèn)細(xì)胞貼壁；

6、定期更換培養(yǎng)液，直至細(xì)胞系重新建立。

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